Phương Pháp Pcr Xét Nghiệm Covid

--- Bài mới hơn ---

  • Những Ai Cần Làm Xét Nghiệm Rt
  • Tại Sao Áp Dụng Gộp Mẫu Thực Hiện Xét Nghiệm Rt
  • Tìm Hiểu Phương Pháp Xét Nghiệm Pcr Hiv Hiện Nay
  • Tư Vấn Xét Nghiệm Hiv Bằng Phương Pháp Pcr
  • Tìm Hiểu Về Dịch Vụ Xét Nghiệm Xác Định Đột Biến Gen Bằng Kỹ Thuật Pcr
  • Xét nghiệm đang được dùng để xác định nhiễm virus Corona được gọi là xét nghiệm PCR (Polymerase chain reaction) hay còn có tên là xét nghiệm sinh học phân tử từ chuỗi phản ứng Polimerase. PCR là một kỹ thuật không mới, được phát minh bởi nhà khoa học người Mỹ Kary Mullis. Trên thực tế người ta đã sử dụng PCR từ những năm 1980 và ứng dụng phương pháp này vào chẩn đoán cho các bệnh truyền nhiễm khác. Đây là một kỹ thuật nhằm tạo ra một lượng lớn các bản sao DNA mục tiêu sao cho đủ nhiều để phát hiện và xác nhận sự nhiễm trùng. Chỉ từ một lượng mẫu rất nhỏ, kỹ thuật PCR cũng có thể khuếch đại và tạo ra hàng triệu bản sao một cách chính xác và dễ dàng.

    Để kiểm tra sự tồn tại của virus trước hết người ta sẽ dùng que lấy mẫu tại các mô và dịch cơ thể ở nhiều vị trí, thường sẽ là mũi hoặc cổ họng của bệnh nhân. Que mẫu sau đó sẽ được bảo quản trong ống và gửi đến phòng thí nghiệm để phân tích. Quá trình phân tích diễn ra khá phức tạp và thường tốn một vài ngày cho tới vài tuần kể từ khi lấy mẫu.

    DNA chính là vật liệu di truyền để cấu thành các đặc điểm của chúng ta và cả một số loại virus. Thế nhưng virus gây ra COVID-19, SARS-CoV-19 (và nhiều loại virus khác) lại không chứa các chuỗi DNA kép mà chỉ chứa RNA chuỗi đơn. Bên cạnh đó do xét nghiệm PCR chỉ có thể tạo ra bản sao cho DNA, vì thế trước hết người ta cần phải chuyển đổi RNA thành DNA.

    Người ta sẽ chiết xuất RNA của virus từ que mẫu. Sau đó, mẫu thử cần được lọc tế bào người và các enzyme ra để đem đi làm xét nghiệm PCR. Thông thường các phòng thí nghiệm sẽ sử dụng bộ kits dụng cụ được sản xuất đặc biệt phục vụ cho mục đích này. Sau đó, RNA tinh khiết được trộn với một enzyme được gọi là enzyme phiên mã ngược, enzyme này sẽ có nhiệm vụ chuyển đổi RNA chuỗi đơn thành DNA chuỗi kép để có thể sử dụng được kỹ thuật PCR. Cái vụ chuyển từ RNA thành DNA này sinh học cấp hai có rồi đó, anh em nào mà học chăm là biết à.

    Tiếp đến, DNA của virus được cho vào ống nghiệm và thêm vào các chất sau:

    • Các đoạn mồi: Đây là những đoạn DNA ngắn được chế tạo để có thể liên kết với DNA của virus.
    • Nucleotide: những thành phần cơ sở để cấu thành DNA, gồm các loại A T G X
    • Một enzyme tạo dựng DNA: mục đích để tạo ra các bản sao cho DNA
    • Một máy PCR gia nhiệt hỗn hợp sẽ được sử dụng để làm duỗi thẳng các đoạn DNA sợi kép, sau đó các đoạn mồi có thể liên kết được với DNA khi đã nguội. Khi các đoạn mồi đã liên kết với DNA, chúng sẽ tạo ra một điểm khởi đầu cho các enzyme xây dựng DNA và bắt đầu sao chép các đoạn đó để tạo ra DNA. Thông qua việc gia nhiệt và làm lạnh, quá trình này sẽ lặp lại nhiều lần đến khi hàng triệu bản sao DNA được tạo ra. Điều này cũng giải thích cách PCR khuếch đại mã di truyền của virus.
    • Tiếp đến thuốc nhuộm huỳnh quang được thêm vào ống nghiệm trong khi DNA đang được nhân bản. Thuốc nhuộm này liên kết với DNA đã sao chép, làm tăng cường màu huỳnh quang và sáng hơn. Chính ánh sáng này là dấu hiệu để người ta nhận biết sự hiện diện của virus.

    Cường độ huỳnh quang tỉ lệ thuận với các bản sao DNA của virus được tạo ra. Khi cường độ huỳnh quang của mẫu vượt quá ngưỡng mức nhất định thì mẫu được xem là dương tính. Trong trường hợp mẫu không chứa virus, xét nghiệm PCR không tạo ra các bản sao, do đó ngưỡng huỳnh quang không đạt mức nền, thử nghiệm được xem là âm tính.

    Lý do đơn giản là bởi thời gian, kết quả xét nghiệm PCR có thể mất đến vài giờ. Vấn đề về thời gian cùng với khả năng có thể xét nghiệm sẽ tạo ra giới hạn số lượng xét nghiệm mà một phòng thí nghiệm có thể thực hiện trong một ngày. Chẳng hạn một phòng thí nghiệm nghiên cứu nhỏ có thể xét nghiệm được 80 mẫu một ngày, với những nơi quy mô được trang bị nhiều máy hơn, năng suất có thể là 1000-2000 mẫu. Một hạn chế khác là việc thiếu thuốc thử cần thiết để làm xét nghiệm. Do nhu cầu xét nghiệm rất cao dẫn đến sự thiếu hụt, nhiều quốc gia đã bị trì hoãn do thiếu thuốc thử.

    Mặc dù kỹ thuật PCR có độ chính xác cao thế nhưng ở một số trường hợp, kết quả cũng có sự sai lệch. Nguyên nhân chủ yếu là do mẫu phẩm bị nhiễm bẩn, hay bảo quản không đúng cách cũng có thể làm sai lệch kết quả, dẫn đến trường hợp dương tính giả (khi ai đó không có virus nhưng xét nghiệm lại có) hoặc âm tính giả (khi ai đó có virus nhưng kết quả cho thấy họ không nhiễm bệnh).

    Hạn chế cuối cùng của phương pháp PCR là kỹ thuật này chỉ có thể nhận biết virus tại ngay thời điểm thực hiện xét nghiệm. Trong trường hợp nếu ai đó đã từng mắc bệnh sau đó hồi phục trước thời điểm xét nghiệm, thì phương pháp này không thể xác định được. Bởi nếu ai đó đã từng có virus và đã phục hồi, họ sẽ sinh ra miễn dịch kháng virus trong một thời gian trước khi có khả năng tái nhiễm.

    Còn để xét nghiệm liệu ai đó đã từng nhiễm virus trước kia hay không, người ta sử dụng loại xét nghiệm dựa trên kháng thể. Vì khi đó cơ thể người từng nhiễm bệnh sẽ sản sinh ra loại kháng thể chống lại virus, các kháng thể đó vẫn tồn tại trong máu suốt một khoảng thời gian sau khi nhiễm bệnh. Và với phương pháp xét nghiệm kháng thể, người ta có thể phát hiện ra chúng. Hiện tại, một số công ty đang nghiên cứu xét nghiệm kháng thể đối với virus SARS-CoV-2 và dự kiến phương pháp này sẽ được triển khai nhanh chóng khi đã sẵn sàng.

    Ngoài ra, trong trường hợp thiếu hụt bộ dụng cụ xét nghiệm PCR, người ta cũng thực hiện một số xét nghiệm khác hiệu quả như xét nghiệm tìm kiếm các protein cụ thể trên bề mặt virus. Mặc dù phương pháp này tốn thời gian ít hơn so với PCR, thế nhưng độ sai lệch của phương pháp này cũng lớn hơn. Do đó, nhiều khả năng kết quả sẽ không chính xác.

    Cho đến khi tốc độ và số lượng thực hiện xét nghiệm tăng lên, nhiều quốc gia vẫn đang khuyến cáo người dân nên tự chủ động bảo vệ bản thân, tự cách ly tại nhà và khai báo y tế để ngăn chặn sự lây lan của virus.

    --- Bài cũ hơn ---

  • Chi Phí Khám Phụ Khoa Hết Bao Nhiêu Tiền 2022 (Giá Niêm Yết)
  • Oxygen Phương Pháp Điều Trị Viêm Đường Tiết Niệu Nữ Giới
  • Sinh Con Trai Theo Ý Muốn Bằng Phương Pháp Shettles
  • Sinh Con Theo Ý Muốn Bằng Phương Pháp Shettles
  • Phương Pháp Tránh Thai Tính Bằng Vòng Kinh Của Knaaus Và Ogino
  • Tư Vấn Xét Nghiệm Hiv Bằng Phương Pháp Pcr

    --- Bài mới hơn ---

  • Tìm Hiểu Về Dịch Vụ Xét Nghiệm Xác Định Đột Biến Gen Bằng Kỹ Thuật Pcr
  • Các Kỹ Thuật Pcr Và Ứng Dụng
  • Máy Pcr Là Gì? Công Dụng Của Máy Pcr Pockit Cầm Tay
  • Khái Quát Về Kỹ Thuật Real Time Pcr Là Gì? Ứng Dụng Chẩn Đoán Bệnh Tôm
  • Pcr Là Gì? Nguyên Tắc, Qúa Trình & Ứng Dụng Của Máy Chu Kỳ Nhiệt
  • PCR (Polymerase Chain Reaction – Phản ứng chuỗi trùng phân) là một kỹ thuật then chốt trong di truyền học phân tử, được áp dụng để test kiểm tra nhiễm HIV giai đoạn sớm với độ nhạy cao.

    Kĩ thuật này cho phép phân tích bất kỳ một đoạn ngắn nào của chuỗi ADN (hay của chuỗi ARN) mà không phải nhân dòng vô tính đoạn ADN đó.

    PCR được sử dụng để tái tạo (khuếch đại) những đoạn ADN chọn lọc. Trước đây, việc khuếch đại này được thực hiện nhờ những vi khuẩn và phải mất hàng tuần. Nhưng giờ đây với kỹ thuật PCR được thực hiện trong các ống nghiệm thì chỉ mất một vài giờ. PCR hiệu quả cao đến nỗi có thể tạo ra vô số bản sao của ADN. Ngoài ra, PCR sử dụng chính những phân tử mà thiên nhiên sử dụng để sao chép ADN:

    – Hai “phân tử mồi” để đánh dấu vị trí bắt đầu và kết thúc của chuỗi ADN cần sao chép.

    – Một enzym có tên là polymerase (enzyme đồng phân hóa) chạy dọc theo đoạn ADN đó, đọc mã của ADN và lắp ráp nên một bản sao của ADN.

    – Rất nhiều khối bazơ mà polymerase sử dụng để xây nên bản sao của ADN.

    Do thử nghiệm PCR quá nhạy cảm, nên khi áp dụng trong chẩn đoán, một vấn đề rất quan trọng cần phải lưu tâm, đó là hiện tượng dương tính giả, chủ yếu là do mẫu thử bị nhiễm bởi các sản phẩm PCR trước đó. Chỉ cần mẫu thử bị nhiễm một hoặc vài mảnh sản phẩm PCR thì các mảnh này sẽ được khuếch đại và mẫu cho kết quả dương nhưng là dương giả. Đợi 12 tuần là cần thiết. Việc gì mà vội hả bạn ?

    Hiện nay xét nghiệm DNA_ PCR(Chuỗi phản ứng polymerase) là một trong những xét nghiệm có độ chính xác cao nhất tuy nhiên thời gian chính xác để thực hiện xét nghiệm này từ ngày có hanh vi nguy cơ vẫn còn gây nhiều tranh cãi (theo các tài liệu nước ngoài là 28 ngày,một số tài liệu của VN là 10 ngày hoặc theo một số bác sĩ của viện Pasteur là từ 3-7 ngày). Đây là một xét nghiệm khá tốn kém và quy trình khá phức tạp( dựa trên kĩ thuật nhiệt) nên thường chỉ dùng cho trẻ em(dưới 18 tháng tuổi) để phát hiện bản sao bộ ADN của HIV.Như Hiện tại theo mình biết viện Pasteur TPHCM dùng phương pháp này để xét nghiệm cho trẻ em dưới 18 tháng tuổi hoặc dùng đo nồng độ vi rút cho người có HIV.Viện Pasteur TPHCM nếu xét nghiệm PCR âm tính (dưới ngưỡng phát hiện) thì Bác Sĩ vẫn khuyên sau 12 tuần xét nghiệm lại

    Mọi thắc mắc về vấn đề HIV, vui lòng gọi đến tổng đài 19006237 để được tư vấn HIV, tư vấn xét nghiệm HIV trực tiếp từ các chuyên gia.

    --- Bài cũ hơn ---

  • Tìm Hiểu Phương Pháp Xét Nghiệm Pcr Hiv Hiện Nay
  • Tại Sao Áp Dụng Gộp Mẫu Thực Hiện Xét Nghiệm Rt
  • Những Ai Cần Làm Xét Nghiệm Rt
  • Phương Pháp Pcr Xét Nghiệm Covid
  • Chi Phí Khám Phụ Khoa Hết Bao Nhiêu Tiền 2022 (Giá Niêm Yết)
  • Xét Nghiệm Pcr Là Xét Nghiệm Gì?

    --- Bài mới hơn ---

  • Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên
  • Phương Pháp Ôn Thi Học Sinh Giỏi Môn Văn
  • Tài Liệu Hướng Dẫn Ôn Thi Học Sinh Giỏi Môn Văn
  • Phương Pháp Ôn Thi Môn Văn Đạt Điểm Cao
  • Xử Lý Nước Thải Bằng Phương Pháp Oxi Hóa Khử
  • Xét nghiệm PCR (Polemerase Chain Reaction, phản ứng chuỗi polymerase) được cho là xét nghiệm có giá trị rất cao và được thực hiện từ trong giai đoạn sớm. Đây là một phương pháp xét nghiệm có độ nhạy và độ đặc hiệu rất cao.

    1. Xét nghiệm PCR là gì?

    Xét nghiệm PCR hay còn gọi là xét nghiệm sinh học phân tử là một kỹ thuật nhằm tạo ra một lượng lớn bản sao DNA mục tiêu trong ống nghiệm dựa vào các chu kỳ nhiệt. Kỹ thuật này được nhà khoa học người Mỹ Kary Mullis phát minh vào năm 1985.

    Xét nghiệm PCR đóng vai trò quan trọng trong lĩnh vực công nghệ sinh học do phản ứng rất nhạy và cho kết quả đặc hiệu. Xét nghiệm PCR thường có kết quả độ chính xác rất cao. Tuy nhiên kết quả cũng còn tùy thuộc trình độ của kỹ thuật viên, phương tiện máy móc làm việc và việc quản lý chất lượng. Cùng một xét nghiệm nhưng có nơi cho kết quả nhạy và chính xác, nơi khác thì không có được độ nhạy bằng.

    Hiện nay để thực hiện xét nghiệm PCR thường đắt tiền hơn so với các xét nghiệm thông thường khác do hầu hết hóa chất để làm phản ứng đều phải nhập ngoại và phải mua với giá cao. Chưa kể các thiết bị để làm xét nghiệm PCR cũng lên đến vài chục ngàn USD/máy. Để xét nghiệm một bệnh phẩm, thường bạn phải chi trả 8-10 USD/lần.

    2. Xét nghiệm PCR chẩn đoán bệnh gì?

    • Phát hiện các tác nhân không thể nuôi cấy thường quy: như các virus (viêm gan B, viêm gan C, Dengue, HIV, Herpes, CMV, EBV, HPV, virus SARS, H5N1…), các vi khuẩn (Chlamydia, Legionella, Mycoplasma, Treponema pallidum…).
    • Phát hiện các vi khuẩn lậu (Chlamydia, Legionella, Mycoplasma, Treponema pallidum…).
    • Phát hiện các tác nhân nuôi cấy thất bại vì có mặt rất ít trong bệnh phẩm, đã bị điều trị kháng sinh trước đó (vd: Lao thất bại nuôi cấy, viêm màng não mủ mất đầu…).
    • Phát hiện mầm mống của bệnh ung thư (tìm HPV trong ung thư cổ tử cung, phát hiện gen APC trong ung thư đại tràng, gen BRCA1 – BRCA2 trong ung thư vú, gen TPMT trong bệnh bạch cầu trẻ em, gen Rb-105 trong u nguyên bào lưới, gen NF-1,2 trong u xơ thần kinh, gen IgH và TCRy trong u lympho không Hodgkin…)
    • Nghiên cứu về hệ kháng nguyên bạch cầu người (HLA, human lymphocyte antigen)…
    • Phát hiện các chủng vi khuẩn kháng thuốc như S.aureus – MRSA, các vi khuẩn sinh ESBL hoặc betalactamase, carbapenemase…)
    • Xác định độc tố của vi sinh vật: Tiểu đơn vị A của độc tố ruột không chịu nhiệt của Escherichia coli.
    • Trong công nghệ sinh học, xét nghiệm sinh học phân tử được sử dụng trong việc lập bản đồ gen, phát hiện gen, dòng hoá gen, giải mã trình tự ADN…

    3. Ưu – nhược điểm của xét nghiệm PCR

    3.1. Ưu điểm

    Phương pháp xét nghiệm PCR có nhiều ưu điểm vượt trội hơn hẳn so với xét nghiệm thông thường khác như:

    • Cho kết quả xét nghiệm nhanh, thường không quá 5 giờ kể từ khi bắt đầu làm xét nghiệm.
    • Phát hiện được các tác nhân vi sinh vật gây bệnh mà phòng thí nghiệm lâm sàng không có khả năng phát hiện với các xét nghiệm vi sinh hay miễn dịch truyền thống như các tác nhân virus (HCV, HBV, HPV…)
    • Xét nghiệm sinh học phân tử cho phép xác định được những tác nhân vi sinh không thể triển khai nuôi cấy được tại phòng thí nghiệm lâm sàng vì khả năng gây dịch cao (H5N1) hay khó nuôi cấy (C. trachomatis, L.pneumophila), hay có mặt rất ít trong bệnh phẩm ( tuberculosis trong lao ngoài phổi, tác nhân viêm màng não mủ cụt đầu…), hay là các tác nhân có thể nuôi cấy được nhưng thời gian có kết quả chung cuộc quá lâu (M. tuberculosis).
    • Xét nghiệm PCR còn có thể cho ra kết quả định lượng chính xác số bản copies virus/ 1 ml máu. Từ đó hỗ trợ rất đắc lực cho bác sĩ đánh giá được hiệu quả điều trị, cũng như tiên lượng giai đoạn bệnh.
    • Phát hiện các đột biến gen gây ung thư, gây các bệnh di truyền khác…nhằm có biện pháp phòng ngừa bệnh.
    • Xác định mối quan hệ huyết thống giữa những cá thể khác nhau.

    3.2. Nhược điểm

    • Xét nghiệm PCR rất khó thực hiện được một cách chuẩn mực tại các phòng thí nghiệm lâm sàng.
    • Giá thành của xét nghiệm PCR khá cao.
    • Xét nghiệm PCR đòi hỏi trình độ của kỹ thuật viên, bác sĩ phải là người có trình độ chuyên môn cao.
    • Đòi hỏi trang thiết bị, máy móc kỹ thuật hiện đại.

    Để được tư vấn trực tiếp, Quý Khách vui lòng bấm số HOTLINE hoặc đăng ký trực tuyến TẠI ĐÂY.

    --- Bài cũ hơn ---

  • Chữa Viêm Âm Đạo Hiệu Quả Bằng Phương Pháp O3 Oxygen
  • Điều Chỉnh Tật Cận Thị Bằng Kính Tiếp Xúc Cứng Qua Đêm Ortho
  • Tìm Hiểu Về Hàm Nội Suy Trong Excel
  • Phương Pháp Nghiên Cứu Định Tính
  • Top 8 Các Phương Pháp Nghiên Cứu Định Tính Phổ Biến
  • Xét Nghiệm Phát Hiện Bệnh Lậu Bằng Phương Pháp Pcr

    --- Bài mới hơn ---

  • Các Quy Trình Xét Nghiệm Chẩn Đoán
  • Máy Pcr Là Gì? Các Loại Máy Pcr Trong Chăn Nuôi
  • Kỹ Thuật Pcr Là Gì? Ứng Dụng Trong Chẩn Đoán Bệnh Trên Tôm Thế Nào?
  • Phương Pháp Định Tính Bằng Kỹ Thuật Polymerase Chain Reaction
  • Người Dân Hà Nội Lo Lắng, Chờ Đợi Được Xét Nghiệm Rt
  • Bệnh lậu là một trong những bệnh lây truyền qua đường tình dục phổ biến nhất hiện nay. Bệnh do song cầu khuẩn lậu Neisseria gonorrhoeae gây nên khi có quan hệ tình dục không an toàn với người bệnh hoặc tiếp xúc vết thương hở hay sử dụng chung đồ dùng cá nhân có chứa dịch khuẩn lậu của người bệnh, lây từ mẹ sang con khi sinh thường qua đường âm đạo nếu người mẹ mắc lậu.

    Triệu chứng điển hình của bệnh lậu là tình trạng tiểu buốt, tiểu rắt, tiểu lắt nhắt, tiểu đau và tiểu ra mủ có mùi hôi khó chịu, kèm theo ngứa rát, sưng đau, tấy đỏ ở bộ phận sinh dục, đau khi quan hệ tình dục và khi xuất tinh,…

    Những triệu chứng này khá giống với triệu chứng của bệnh đường tiết niệu, viêm nhiễm nam khoa, viêm phụ khoa nên rất khó nhận biết và hầu hết người bệnh thường chủ quan không điều trị hoặc tự ý mua thuốc về dùng khiến cho bệnh không khỏi, tái phát thường xuyên gây nhiều biến chứng nguy hiểm cho sức khỏe và sức khỏe sinh sản, có thể gây vô sinh – hiêm muộn. Thậm chí, vi khuẩn lậu có thể lây nhiễm đến máu, não,… gây nhiễm trùng đường huyết, viêm màng não,… dẫn tới tử vong.

    Vì vậy, khi có những triệu chứng nghi ngờ mắc bệnh lậu thì người bệnh phải thăm khám và thực hiện các xét nghiệm cần thiết để phát hiện bệnh sớm nhằm có phương pháp điều trị hiệu quả.

    Hiện nay, một trong những phương pháp xét nghiệm bệnh lậu được nhiều người nhắc tới là phương pháp xét nghiệm PCR.

    Vậy phương pháp xét nghiệm lậu PCR là như thế nào?

    Các bác sỹ tại phòng khám Đa khoa Quốc tế Cộng Đồng cho biết: Khi thực hiện xét nghiệm bệnh lậu, người bệnh thường được thực hiện bằng các phương pháp sau:

    • Phương pháp xét nghiệm nuôi cấy: Nuôi cấy lậu cầu trong môi trường sử dụng Thayer-Martin. Việc nuôi cấy lậu cầu cho kết quả dương tính là mắc bệnh.
    • Phương pháp nhuộm Gram âm (-): Các bác sỹ sẽ lấy dịch từ niệu đạo (ở nam giới) hoặc âm đạo (ở nữ giới) nhuộm bệnh phẩm soi tươi và tìm song cầu khuẩn bắt màu gram âm (-) nằm trong và ngoài bạch cầu đa nhân trung tính thì chắc chắn là bị nhiễm lậu.
    • Phương pháp xét nghiệm PCR: Sử dụng tăm bông vô trùng lấy dịch tiết từ niêu đạo (nam giới), âm đạo, cổ tử cung (nữ giới). Tăm bông bệnh phẩm được giữ ở nhiệt độ -70oC cho tới khi tách ADN. Đây là kỹ thuật xét nghiệm mới có độ đặc hiệu và độ nhạy cao. Kỹ thuật này chỉ có những cơ sở y tế chuyên sâu mới áp dụng.
    • Ngoài ra, người bệnh có thể sẽ phải thực hiện thêm một số xét nghiệm khác (xét nghiệm máu, xét nghiệm nước tiểu) tùy theo chỉ định của bác sỹ.

    Việc thực hiện các xét nghiệm trên để phát hiện bệnh lậu có ý nghĩa quan trọng trong việc điều trị. Nếu kết quả xét nghiệm sai sẽ dẫn đến việc điều trị sai gây nhiều ảnh hưởng đến sức khỏe, tốn thời gian và chi phí. các chuyên gia y tế của phòng khám sẽ giải đáp cụ thể hoặc gọi điện thoại về số máy: 0243.3131.999 để được tư vấn và đặt lịch hẹn khám miễn phí.

    Lưu ý: Hiệu quả/Công dụng có thể khác nhau tùy theo thể trạng/cơ địa mỗi người. Do đó, các bạn hãy liên hệ trực tiếp để được tư vấn rõ hơn

    Chúc mọi người sớm khỏi bệnh và chúng tôi nhắc lại, ai bị bệnh nam khoa – bệnh xã hội – phụ khoa hoặc hậu môn trực tràng có thể để lại SĐT để được giúp đỡ 24/7

    Kiểm tra sức khỏe qua Bài test

    --- Bài cũ hơn ---

  • Kiểm Nghiệm Salmonella Bằng Phương Pháp Real
  • Nguyên Tắc Real Time Pcr
  • Phương Pháp Real Time Pcr Với Kit Iiq
  • Xét Nghiệm Pcr Trong Chẩn Đoán Y Khoa
  • Những Điều Bạn Cần Biết Về Xét Nghiệm Pcr Hiv Hiện Nay!
  • Xét Nghiệm Pcr Có Những Ưu

    --- Bài mới hơn ---

  • Bạn Biết Gì Về Những Ứng Dụng Của Xét Nghiệm Pcr Trong Y Học?
  • Quá Trình Xử Lý Dữ Liệu
  • Sáng Kiến Kinh Nghiệm Phương Pháp Phân Tích Đa Thức Thành Nhân Tử Trong Giải Toán Ở Thcs
  • Chuyên Đề: Một Số Phương Pháp Phân Tích Đa Thức Thành Nhân Tử
  • Các Phương Pháp Niêm Yết Tỷ Giá
  • 1. Xét nghiệm PCR là gì?

    PCR (Polymerase Chain Reaction gọi là phản ứng chuỗi polymerase) là một kỹ thuật được phát minh vào năm 1985 bởi một nhà khoa học người Mỹ tên là Kary Mullis. Phát minh này được coi là một cuộc cách mạng lớn đối với nền y học thế giới, và đã được trao giải thưởng danh giá Nobel vào năm 1993.

    Phương pháp xét nghiệm PCR có thể nhân bản một lượng lớn lên đến hàng triệu bản ADN nhằm phục vụ cho các quá trình khảo sát trong phản ứng.

    Nguyên lý hoạt động của PCR là nhằm tạo ra một lượng lớn các bản sao ADN từ một đoạn ADN chọn lọc chỉ trong một thời gian ngắn. Sự sao chép ADN được diễn ra trong môi trường in vitro tương tự như trong quá trình phân bào.

    Bằng kỹ thuật PCR, từ một lượng khuôn ADN rất nhỏ như: một giọt máu, một sợi tóc hay một tế bào,… người ta có thể khuếch đại chính xác, trật tự một lượng lớn lên đến hàng triệu bản nhằm phục vụ cho các quá trình khảo sát trong phản ứng.

    Đặc biệt, phương pháp PCR có độ nhạy đặc nhạy lên tới 90,4% và độ đặc hiệu là 94% khi so sánh với phương pháp nuôi cấy (tiêu chuẩn vàng).

    Như vậy, xét nghiệm PCR cho kết quả chính xác cao hơn các phương pháp xét nghiệm truyền thống. Nó có thể giúp phát hiện ra nhiều loại vi khuẩn gây bệnh và tiết kiệm được nhiều thời gian hơn.

    2. Xét nghiệm PCR chẩn đoán những bệnh gì?

    – Phát hiện các tác nhân vi sinh vật gây bệnh như các virus (viêm gan B, viêm gan C, HIV, Herpes, CMV, EBV, HPV, virus SARS, H5N1…).

    – Phát hiện các vi khuẩn lậu (Chlamydia, Legionella, Mycoplasma, Treponema pallidum…).

    – Phát hiện virus Dengue gây bệnh sốt xuất huyết.

    – Phát hiện mầm mống của bệnh ung thư (tìm HPV trong ung thư cổ tử cung, phát hiện gen APC trong ung thư đại tràng, gen BRCA 1 – BRCA 2 trong ung thư vú, gen TPMT trong bệnh bạch cầu trẻ em, gen Rb-105 trong u nguyên bào lưới, gen NF-1,2 trong u xơ thần kinh, gen IgH và TCRy trong u lympho không Hodgkin…)

    Xét nghiệm PCR có thể phát hiện được virus HPV với độ chính xác cao.

    – Nghiên cứu về hệ kháng nguyên bạch cầu người (HLA, human lymphocyte antigen)…

    – Phát hiện các chủng vi khuẩn kháng thuốc như S.aureus – MRSA, các vi khuẩn sinh ESBL hoặc betalactamase, carbapenemase…)

    Trong công nghệ sinh học, PCR được sử dụng trong việc lập bản đồ gen, phát hiện gen, dòng hoá gen, giải mã trình tự ADN…

    3. Xét nghiệm PCR bao nhiêu tiền?

    Xét nghiệm PCR thường có giá thành cao bởi những hoá chất để làm phản ứng đều phải nhập ngoại. Đó là chưa kể đến những máy móc thiết bị xét nghiệm PCR cũng có giá thành lên tới hàng chục ngàn USD. Thông thường, để xét nghiệm một bệnh phẩm bằng phương pháp PCR, người bệnh phải tiêu tốn tối thiểu 8 – 10 USD/ lần xét nghiệm.

    4. Những ưu – nhược điểm của xét nghiệm PCR.

    4.1. Ưu điểm

    Phương pháp xét nghiệm PCR có nhiều ưu điểm vượt trội hơn hẳn so với xét nghiệm truyền thống như:

    – Cho kết quả xét nghiệm nhanh, thường không quá 5 giờ kể từ khi bắt đầu làm xét nghiệm.

    – Phát hiện được các tác nhân vi sinh vật gây bệnh mà phòng thí nghiệm lâm sàng không có khả năng phát hiện với các xét nghiệm vi sinh hay miễn dịch truyền thống như các tác nhân virus (HCV, HBV, HPV…), tác nhân vi sinh không thể triển khai nuôi cấy được tại phòng thí nghiệm lâm sàng vì khả năng gây dịch cao (H5N1) hay khó nuôi cấy (C. trachomatis, L.pneumophila), hay có mặt rất ít trong bệnh phẩm ( tuberculosis trong lao ngoài phổi, tác nhân viêm màng não mủ cụt đầu…), hay là các tác nhân có thể nuôi cấy được nhưng thời gian có kết quả chung cuộc quá lâu (M. tuberculosis).

    – Xét nghiệm PCR còn có thể cho ra kết quả định lượng chính xác số bản copies virus/ 1 ml máu. Từ đó hỗ trợ rất đắc lực cho bác sĩ đánh giá được hiệu quả điều trị, cũng như tiên lượng giai đoạn bệnh.

    – Phát hiện các đột biến gen gây ung thư, gây các bệnh di truyền khác…nhằm có biện pháp phòng ngừa bệnh.

    – Xác định mối quan hệ huyết thống giữa những cá thể khác nhau.

    4.2. Nhược điểm

    – Xét nghiệm PCR rất khó thực hiện được một cách chuẩn mực tại các phòng thí nghiệm lâm sàng.

    – Giá thành khá cao.

    – Đòi hỏi trình độ của kỹ thuật viên, bác sĩ phải là người có trình độ cao.

    – Đòi hỏi trang thiết bị , máy móc kỹ thuật hiện đại.

    Xét nghiệm PCR là kỹ thuật phức tạp, hỏi nhân viên kỹ thuật, bác sĩ phải giàu kinh nghiệm, có trình độ cao.

    5. Xét nghiệm PCR ở đâu nhanh và chính xác nhất?

    Xét nghiệm PCR là kỹ thuật phức tạp, đòi hỏi trang bị hiện đại, đồng thời với độ nhạy phản ứng rất cao đòi hỏi nhân viên kỹ thuật, bác sĩ phải giàu kinh nghiệm, có trình độ cao, tuân thủ chặt chẽ quy trình kỹ thuật để tránh hiện tượng dương tính giả khi bị nhiễm lại sản phẩm PCR. Do những yêu cầu cao như vậy nên không phải ở bất cứ bệnh viện nào cũng có thể tiến hành làm xét nghiệm PCR được.

    Do đòi hỏi trang thiết bị hiện đại nên không phải bệnh viện nào cũng có thể làm xét nghiệm PCR.

    Hiện nay, tại Bệnh viện Đa khoa MEDLATEC đang sử dụng phương pháp realtime PCR (là một cải tiến kỹ thuật cao hơn của phương pháp PCR) để giúp nâng cao hiệu quả trong chẩn đoán và điều trị các loại bệnh lý nói chung. Với công nghệ đầu dò Taqman (Taqman probe) cùng chứng nội tại (Internal control) được cho vào ngay từ quá trình tách chiết cho phép kiểm soát toàn bộ quá trình xét nghiệm từ đó cho ra kết quả nhanh chóng và chính xác hơn. Bệnh nhân sẽ nhận được kết quả xét nghiệm PCR chỉ sau vài giờ đồng hồ, tiết kiệm được rất nhiều thời gian và chi phí khi thăm khám, đi lại.

    Hy vọng qua những thông tin hữu ích trong bài viết trên, bạn đã có cái nhìn tổng quan hơn về phương pháp xét nghiệm PCR, những ưu điểm và hạn chế của phương pháp này cùng những địa chỉ làm xét nghiệm chính xác, uy tín nhất hiện nay.

    --- Bài cũ hơn ---

  • Lựa Chọn Phương Pháp Tạo Hạt Ướt Để Điều Chế Viên Nén
  • Cách Tính Tần Số Hoán Vị Gen
  • Phương Pháp Xử Lý Số Liệu
  • Top 7 Methods To Fix Computer Won’t Wake Up From Sleep Or Hibernate After Windows 10 Update
  • Các Phương Pháp Xác Định Cod, Bod, Do
  • Tìm Hiểu Phương Pháp Xét Nghiệm Pcr Hiv Mới Nhất Hiện Nay

    --- Bài mới hơn ---

  • Tư Vấn Xét Nghiệm Hiv Bằng Phương Pháp Pcr
  • Tìm Hiểu Về Dịch Vụ Xét Nghiệm Xác Định Đột Biến Gen Bằng Kỹ Thuật Pcr
  • Các Kỹ Thuật Pcr Và Ứng Dụng
  • Máy Pcr Là Gì? Công Dụng Của Máy Pcr Pockit Cầm Tay
  • Khái Quát Về Kỹ Thuật Real Time Pcr Là Gì? Ứng Dụng Chẩn Đoán Bệnh Tôm
  • Virus HIV sống được bao lâu ?

    Virus HIV có thể tồn tại trong không khí với nhiệt độ trung bình từ 32 đến 36 độ không quá 5 phút. Ỏ trong những giọt máu khô thì virus có thể sống từ 2-7 ngày và trong xác chết thì virus có thể sống trong 72 giờ.

    Cùng với đó đối với những giọt máu của người bị nhiễm HIV ở trên đường mà bị ánh nắng chiếu vào thì virus HIV có thể sống được trong khoảng 30 phút. Đối với những giọt máu ở trong những chỗ ẩm thấp thì virus HIV có thể sống trong 48h hoặc có thể là 1 tuần.

    Phương pháp xét nghiệm PCR HIV là phương pháp xét nghiệm có giá trị cao nhất trong các phương pháp xét nghiệm HIV. Phương pháp này có thể tạo ra một lượng lớn các bản sao DNA mà không cần phải nhân dòng vô tính của đoạn DNA đó hoặc các gen này được khuếch đại với một mục tiêu trong ống nghiệm dựa vào chu kỳ nhiệt độ.. Đây cũng là phương pháp xét nghiệm HIV có độ chính xác và độ hiệu quả cao nhất.

    PCR được sử dụng trong việc khuếch đại những đoạn DNA đã được chọn lọc. Khác với những phương pháp xét nghiệm HIV từ xưa thì việc khuếch đại này sẽ được thực hiện nhờ một số vi khuẩn và các phương pháp này thường mất một khoảng thời gian dài mới có kết quả.

    Hiện nay với việc thực hiện Xét nghiệm HIV bằng phương pháp PCR thì chỉ mất vài giờ thực hiện trên ống nghiệm là đã có kết quả.

    Các bước tiến hành xét nghiệm PCR HIV hiện nay

    Bước 1: Các bác sĩ sẽ tách rời hai chuỗi phân tử DNA ở nhiệt độ khoảng 940 đến 950.

    Bước 2: Tiến hành bắt cặp các cặp mồi đặc hiệu của quy trình DNA được xác định bắt cặp với các sợi DNA đích. Việc bắt cặp này thường được thực hiện ở nhiệt độ khoảng 400 đến 700.

    Bước 3: Ở bước này thì chỉ cần tổng hợp và kéo dài các sợi DNA ở nhiệt độ khoảng 720 do các Taq polymerase sẽ thực hiện tổng hợp các sợi DNA theo một trình tự bổ sung cho các sợi khuôn.

    Ở trẻ sơ sinh trong quá trình chẩn đoán HIV ngoài việc thực hiện xét nghiệm theo phương pháp PCR thì còn có thể sử PCR để phát hiện ra các DNA provirus trong một số tế bào trong tình trạng bị nhiễm bệnh.

    Với phương pháp xét nghiệm PCR HIV được thực hiện ở trên 3 vùng gen đó là: ENV, GAG và cuối cùng là POL. Việc thực hiện trên 3 vùng gen có thể cho kết quả là dương tính ít nhất ở 2 vùng trên 3 vùng gen này với cách thực hiện lấy mẫu ở một số thời điểm khác nhau.

    Ưu điểm và nhược điểm của phương pháp xét nghiệm PCR HIV

    • Phương pháp xét nghiệm PCR HIV có thể phát hiện ra các tác nhân vi sinh vật gây ra bệnh trực tiếp từ bệnh phẩm mà có thể phân loại các kiểu di truyền của các vi sinh vật này mà không cần phải qua môi trường nuôi cấy.
    • Phương pháp xét nghiệm PCR HIV thường cho kết quả giám định nhanh hơn sơ với việc thực hiện xét nghiệm HIV theo phương pháp cũ.
    • Phương pháp xét nghiệm HIV bằng PCR có độ nhạy cực kỳ cao trong việc chẩn đoán bệnh.

    Nhược điểm của phương pháp xét nghiệm này

    • Để có thể thực hiện được phương pháp xét nghiệm PCR HIV này thì phải có một phòng xét nghiệm đủ tiêu chuẩn và được trang bị những thiết bị hiện đại nhất hiện nay. Cùng với việc cần phải có các trang thiết bị hiện đại thì cũng cần các bác sĩ thực hiện phương pháp này có trình độ chuyên môn cực kỳ cao.
    • Chi phí thực hiện xét nghiệm PCR HIV thường đắt hơn so với việc thực hiện xét nghiệm bằng phương pháp cũ. Nguyên nhân chủ yếu là do các hóa chất để thực hiện xét nghiệm PCR HIV thường phải nhập từ nước ngoài với giá cực kỳ cao. Cùng với đó là giá thành của một máy xét nghiệm PCR cũng cực kỳ đắt khoảng mấy chục ngàn USD/ máy. Chi phí thực hiện cũng đắt theo.

    Những địa điểm có thể thực hiện xét nghiệm PCR HIV ở Việt Nam

    • Bệnh viện 198 tại địa chỉ: số 9 Trần Bình , Mai Dịch, Cầu Giấy, Hà Nội.
    • Bệnh viện bệnh nhiệt đới trung ương: số 78 Giải Phóng, Phương Mai, Đống Đa, Hà Nội.
    • Viện Huyết học và truyền máu trung ương: số 14 Trần Thái Tông, Yên Hòa, Cầu Giấy, Hà Nội.
    • Bệnh viện đa khoa Xanh – Pon: số 12 Chu Văn An, Điện Biên, Ba Đình, Hà Nội.
    • Bệnh viện Bạch mai: số 78 Giải Phóng, Phương Mai, Đống Đa, Hà Nội.

    --- Bài cũ hơn ---

  • Tại Sao Áp Dụng Gộp Mẫu Thực Hiện Xét Nghiệm Rt
  • Những Ai Cần Làm Xét Nghiệm Rt
  • Phương Pháp Pcr Xét Nghiệm Covid
  • Chi Phí Khám Phụ Khoa Hết Bao Nhiêu Tiền 2022 (Giá Niêm Yết)
  • Oxygen Phương Pháp Điều Trị Viêm Đường Tiết Niệu Nữ Giới
  • Hà Nội Sẽ Xét Nghiệm Covid

    --- Bài mới hơn ---

  • Hướng Dẫn Theo Dõi Nhập Xuất Tồn Kho Hàng Hóa, Thành Phẩm, Nguyên Vật Liệu Theo Nhiều Kho, Nhiều Lô, Nhiều Đơn Vị Tính
  • Các Phương Pháp Sản Xuất Cồn Khô Hiện Nay
  • Cách Sản Xuất Cồn Thạch Cồn Khô
  • Công Thức, Công Nghệ Sản Xuất Cồn Thạch, Cồn Nước, Cồn Khô
  • Hướng Dẫn Quy Trình Sản Xuất Cồn Khô Và Cồn Thạch
  • Đây là những người đã qua Đà Nẵng và có các biểu hiện ho sốt, khó thở, những trường hợp đi qua các điểm dịch của Đà Nẵng mà Bộ Y tế khuyến cáo hay nhóm đối tượng F1 tiếp xúc trực tiếp với ca bệnh COVID-19.

    Hà Nội sẽ xét nghiệm COVID-19 bằng phương pháp RT-PCR cho hơn 70 nghìn người

    Theo Sở Y tế Hà Nội, qua rà soát thống kê, có 74.905 trường hợp cần xét nghiệm RT-PCR trong chiến dịch này, gồm các đối tượng đã qua Đà Nẵng và có các biểu hiện ho sốt, khó thở, những trường hợp đi qua các điểm dịch của Đà Nẵng mà Bộ Y tế khuyến cáo, tất cả những người đi Đà Nẵng về từ ngày 15/7 đến 28/7 và nhóm đối tượng F1 tiếp xúc trực tiếp với ca bệnh…

    TS Nguyễn Khắc Hiền, Giám đốc Sở Y tế Hà Nội cho biết, “Việc triển khai xét nghiệm RT-PCR sẽ được các đơn vị thực hiện lấy mẫu ngày 8/8 và kết thúc ngày 12/8. Trong đó, 10 quận nội thành và huyện Phúc Thọ sẽ ưu tiên lẫy mẫu xét nghiệm trước. Trên cơ sở danh sách các trường hợp đã khai báo y tế, trung tâm y tế các quận, huyện, thị xã sẽ gửi thông báo đến các đối tượng cần phải lấy mẫu làm xét nghiệm”.

    Để việc xét nghiệm RT-PCR không bị dồn dập, bảo đảm an toàn và hiệu quả, thành phố sẽ tiến hành tách theo nhóm, phân bổ nguồn nhân lực phù hợp. Các đơn vị thực hiện xét nghiệm RT-PCR gồm Trung tâm Kiểm soát bệnh tật Hà Nội; Viện Vệ sinh dịch tễ trung ương, Bệnh viện Bạch Mai, Bệnh viện Nhi trung ương, Bệnh viện Đại học Y Hà Nội… các đơn vị gửi mẫu theo phân luồng quy định đảm bảo an toàn, chất lượng, hiệu quả.

    Cụ thể, cán bộ trung tâm y tế các quận, huyện, thị xã thực hiện lấy mẫu và gửi đến các đơn vị thực hiện xét nghiệm theo phân luồng. Nguyên tắc lấy mẫu cuốn chiếu theo thứ tự ưu tiên; có triệu chứng nghi nhiễm, theo địa bàn tiếp đến là theo thời gian người về sau lấy mẫu trước…

    Giám đốc Sở Y tế Hà Nội cũng yêu cầu các đơn vị cần thực hiện nghiêm túc việc lấy mẫu thực hiện xét nghiệm RT-PCR cho các đối tượng đảm bảo an toàn theo quy định của Bộ Y tế đảm bảo phòng chống tốt dịch bệnh COVID-19.

    Thủ tướng: Sẽ xử lý nghiêm địa phương nào không làm tốt việc chống Covid-19

    Sáng ngày 7/8, Thủ tướng Nguyễn Xuân Phúc đã chủ trì cuộc họp của Thường trực Chính phủ về phòng chống Covid-19. Tại đây, Thủ …

    Tình hình dịch Covid-19 hôm nay: Hà Nội đã hết kit test nhanh, chuyển sang xét nghiệm Realtime-PCR

    Tình hình dịch Covid-19 hôm nay: Hà Nội đã hết kit test nhanh, nhưng người dân cần yên tâm, bình tĩnh, thực hiện tự cách ly, …

    Đà Nẵng xây dựng phương án xét nghiệm COVID-19 cho toàn bộ người dân

    Trước tình hình diễn biến phức tạp của dịch bệnh COVID-19 tại Đà Nẵng, Chủ tịch UBND TP Đà Nẵng yêu cầu xây dựng phương …

    --- Bài cũ hơn ---

  • Đà Nẵng Có 4 Cơ Sở Đầu Tiên Thực Hiện Xét Nghiệm Covid
  • Việt Nam Cán Mốc 1 Triệu Xét Nghiệm Covid
  • Bệnh Viện Vĩnh Đức Triển Khai Xét Nghiệm Covid
  • Bệnh Viện 199 Được Phép Xét Nghiệm Covid
  • Ưu Và Nhược Điểm Của 3 Phương Pháp Chế Biến Cà Phê Nhân Thông Dụng Nhất Hiện Nay
  • Xét Nghiệm Pcr Trong Chẩn Đoán Y Khoa

    --- Bài mới hơn ---

  • Phương Pháp Real Time Pcr Với Kit Iiq
  • Nguyên Tắc Real Time Pcr
  • Kiểm Nghiệm Salmonella Bằng Phương Pháp Real
  • Xét Nghiệm Phát Hiện Bệnh Lậu Bằng Phương Pháp Pcr
  • Các Quy Trình Xét Nghiệm Chẩn Đoán
  • Đến nay, với các bệnh nhiễm trùng, ngành y vẫn áp dụng định đề Koch là phải chỉ ra vi sinh vật gây bệnh. PCR là xét nghiêm “định danh” ở mức gene phân tử có giá trị rất lớn giúp chẩn đoán khá nhiều căn bệnh khó trước đây.

    PCR là gì? Lịch sử phát minh ra nó?

    PCR (Chuỗi Phản ứng Polymerase, Polymerase Chain Reaction) là kỹ thuật phát hiện AND (hoặc ARN) của mầm bệnh hiện diện trong bệnh phẩm nhở vào phản ứng chuỗi enzyme polymerase khuếch đại lên cả triệu lần trong một thời gian ngắn. Nhờ PCR, từ một mẫu rất nhỏ AND (ARN), như từ một giọt máu, một sợi tóc hay chỉ một tế bào… phòng xét nghiệm có thể nhân lên, phóng đại ra hàng triệu bản cho các quá trình khảo sát, xác định tiếp theo.

    PCR vận hành ra sao?

    Nguyên lý hoạt động của PCR là dùng enzyme trùng hợp polymerase để nhanh chóng tạo ra một lượng lớn các bản sao từ một đoạn AND (ARN) chọn lọc.

    Quy trình thực hiện PCR qua ba bước chính: biến tính; kết hợp; và mở rộng (extension), lặp lại từ 30-40 chu kỳ. Chu trình được thực hiện trên một máy quay tự động, một thiết bị làm nóng nhanh và làm lạnh các ống nghiệm chứa hỗn hợp phản ứng.

    * Biến tính (denaturation) thực hiện ở 94o C, giúp sợi xoắn kép DNA tách thành hai đoạn DNA chuỗi đơn.

    * Ủ kết hợp (annealing) thực hiện ở 54o C, các cặp mồi kết hợp với “mẫu” chuỗi đơn, enzyme polymerase gắn vào và bắt đầu sao chép mẫu.

    * Mở rộng (extension) thực hiện ở 72o C, polymerase tổng hợp các chuỗi DNA bổ sung cho mẫu được ghép với mồi, tạo ra một phân tử DNA sợi kép.

    Các chu kỳ được đi lặp lại nhiều lần, nhiều bản sao được tạo ra và số lượng bản sao của mẫu được tăng theo cấp số nhân.

    Đặc biệt, với các virus RNA, như HIV, sởi, quai bị, ZIKA… phòng xét nghiệm sẽ dùng enzyme sao chép ngược reverse trancriptase (RT) để biến đổi đoạn RNA của virus thành DNA rồi tiến hành PCR, xét nghiệm này gọi là RT-PCR (Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction). Kỹ thuật này có hai giai đoạn:

    * Tổng hợp DNA bổ sung từ RNA bằng vào enzyme sao chép ngược (RT),

    * Khuếch đại DNA bổ sung này bằng PCR chính thống.

    Những ứng dụng của PCR

    Kỹ thuật PCR cho phép con người nhân lên cả triệu đoạn AND (ARN) trong thời gian rất ngắn. Vì thế, hiện nay PCR đã trở thành công cụ thiết yếu cho các nhà sinh học, phòng thí nghiệm pháp y, di truyền… ứng dụng để chẩn đoán bệnh di truyền, xác định vi khuẩn và virus, lấy dấu DNA vân tay, nghiên cứu sự tiến hóa của con người, nhân bản DNA của xác ướp, xác định quan hệ huyết thống hay sinh học.v.v…

    * Phát hiện các mầm bệnh không thể nuôi cấy thường quy được như các virus (viêm gan B, viêm gan C, Dengue, HIV, Herpes, CMV, EBV, HPV, virus SARS, H5N1…), các vi khuẩn (Chlamydia, Legionella, Mycoplasma, Treponema pallidum…).

    * Phát hiện các vi khuẩn bệnh lây tình dục (sex transmitted diseases STDs (Chlamydia, Legionella, Mycoplasma, Treponema pallidum…).

    * Phát hiện các tác nhân nuôi cấy thất bại vì ít có mặt trong bệnh phẩm, rất chậm phát triển, hay đã bị điều trị kháng sinh trước đó (lao thất bại nuôi cấy, viêm màng não mủ mất đầu…).

    * Phát hiện nhanh các chủng virus Dengue của bệnh sốt xuất huyết.

    * Phát hiện mầm mống của bệnh ung thư (HPV trong ung thư cổ tử cung, phát hiện gene APC trong ung thư đại tràng, gene BRCA1, BRCA2 trong ung thư vú, gene TPMT trong bệnh bạch cầu trẻ em, gen Rb-105 trong u nguyên bào lưới, gen NF-1,2 trong u xơ thần kinh, gen IgH và TCRy trong u lympho không Hodgkin…)

    * Nghiên cứu về hệ kháng nguyên bạch cầu người (HLA, human lymphocyte antigen)…

    * Phát hiện các chủng vi khuẩn kháng thuốc như S.aureus MRSA, các vi khuẩn sinh ESBL betalactamase, hay carbapenemase…)

    * Xác định độc tố của vi sinh vật: Tiểu đơn vị A của độc tố ruột không chịu nhiệt của Escherichia coli.

    * Trong công nghệ sinh học, xét nghiệm sinh học phân tử PCR được sử dụng trong việc lập bản đồ gen, phát hiện gene, dòng hoá gene, giải mã trình tự ADN…

    Ưu, nhược điểm của PCR

    Xét nghiệm PCR có nhiều ưu điểm vượt trội hơn hẳn so với xét nghiệm thông thường khác như: (1) Cho kết quả xét nghiệm nhanh, không quá 5 giờ kể từ khi bắt đầu làm xét nghiệm; (2) Độ đặc hiệu rất cao; (3) Phát hiện được nhiều tác nhân vi sinh vật gây bệnh mà phòng thí nghiệm hóa, sinh hay miễn dịch truyền thống không phát hiện được (4) Cho kết quả định lượng số copies virus, hỗ trợ bác sĩ điều trị đánh giá giai đoạn, hiệu quả điều trị, và tiên lượng bệnh; (5) Phát hiện các đột biến gene gây ung thư, và các bệnh di truyền khác…nhằm có biện pháp phòng ngừa bệnh.

    Các nhược điểm của xét nghiệm PCR hiện tại: (1) Phải có labo hiện đại, chuẩn mực. Ngoài labo hiện đại, PCR cũng đòi hỏi kỹ thuật viên, bác sĩ phải có trình độ chuyên môn cao, (2) Giá thành xét nghiệm PCR còn khá cao; và (3) Vài trường hợp như đã dùng kháng sinh, lấy hay bảo quản bệnh phẩm sai quy cách có thể ức chế PCR khiến độ nhạy của xét nghiệm thấp.

    Đôi điều bàn luận

    Trong y khoa, chẩn đoán xác định nguyên nhân gốc rễ (root cause) của căn bệnh là khâu đầu tiên và quan trọng nhất. Đặc biệt, trong các bệnh nhiễm trùng, cho đến nay ngành y vẫn áp dụng định đề Koch (Koch’s postulates) đưa ra từ năm 1884 “Tiêu chuẩn vàng để chẩn bệnh nhiễm là chỉ ra vi sinh vật gây bệnh”. Trong thực tế lâm sàng, rất khó đạt được nguyên tắc Koch này vì: (1) lượng vi sinh vật quá ít khó hoặc không phân lập đươc, (2) vi sinh vật nhân lên quá chậm, không kịp cho khâu điều trị đặc hiệu; (3) nhiều yếu tố tác động lên việc thu thập bệnh phẩm.

    Theo lý thuyết, PCR là xét nghiệm “định danh” (identify) ở mức phân tử, bộ gene di truyền hiện đại, nên có độ đặc hiệu (specificity) rất cao, gần tuyệt đối đáp ứng “định đề Koch” để xác định bệnh. Với enzyme polymerase, một mẫu ADN (ARN) rất nhỏ, labo xét nghiệm dễ dàng nhân lên cả ngàn, triệu lần trong khoảng thời gian rất ngắn (khoảng 5 giờ), khiến việc nhận diện mầm bệnh quá dễ dàng, thuận lợi và điều trị kịp thời hơn. Do đó, hiện nay PCR được ứng dụng khá rộng rãi trong y khoa để xác định chẩn đoán.

    Tuy có quá nhiều ưu điểm, nhưng cũng như các xét nghiệm chẩn đoán khác, PCR vẫn có nhược điểm “chết người” là độ nhạy (sensitivity, Se) trong một số bệnh phẩm còn thấp, nghĩa là cho “âm tính giả” còn cao. Điển hình là PCR trong bệnh viêm màng não lao (tuberculous meningitis), một bệnh đòi hỏi phải chẩn đoán và điều trị sớm để tiên lượng tốt và ít biến, di chứng. Dù PCR lao cho dịch não tủy có độ đặc hiệu Sp cao gần tuyệt đối 98%, nhưng độ nhạy Se lại rất thấp 56%. Vì thế, các bác sĩ lâm sàng thường phải: (1) Làm PCR lao thêm trên các mẫu khác, như máu, nước tiểu, đờm, dịch màng phổi, màng bụng; và (2) Làm thêm các xét nghiệm khác như IDR, soi đàm, chụp phổi…

    TS.BS Trần Bá Thoại,

    Uỷ viên BCH Hội Nội tiết Việt Nam

    TÀI LIỆU THAM KHẢO PCR in diagnosis of infection: Detection of bacteria in cerebrospinal fluidshttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC119969/ Polymerase Chain Reaction (PCR)https://www.youtube.com/watch?v=iQsu3Kz9NYo Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR)https://www.khanacademy.org/test-pp/mcat/biological-sciences-practice/biological-sciences-practice-tut/e/reverse-transcriptase-polymerase-chain-reaction--rt-pcr--of-a-uv-dependent-gene Diagnostic accuracy of nucleic acid amplification tests for tuberculous meningitis: a systematic review and meta-analysishttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14522262 Diagnosed tuberculous meningitis using cerebrospinal fluid polymerase chain reaction in patients hospitalized with the diagnosis of meningitis in referral hospitals in Isfahanhttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4468224/

    --- Bài cũ hơn ---

  • Những Điều Bạn Cần Biết Về Xét Nghiệm Pcr Hiv Hiện Nay!
  • Công Ty Hùng Phát Tặng Tỉnh Lâm Đồng Máy Xét Nghiệm Covid
  • : Điều Trị Viêm Âm Đạo Hết Bao Nhiêu Tiền?
  • Chi Phí Chữa Trị Bệnh Đau Bụng Kinh Ở Biên Hòa Giá Bao Nhiêu?
  • Chi Phí Điều Trị Khí Hư Bất Thường Ở Hải Phòng Bao Nhiêu Tiền?
  • Phân Biệt Các Kĩ Thuật Xét Nghiệm Pcr: Rt

    --- Bài mới hơn ---

  • Hô Biến Pcr Thành Real
  • Sự Khác Nhau Giữa Công Chức Và Viên Chức?
  • Cấu While, Meanwhile, Meantime: Công Thức, Sự Khác Biệt Và Bài Tập
  • Phân Biệt During Và Through
  • Cách Dùng Và Phân Biệt “During” Và “Through”
  • PCR (hay là phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase) là một kĩ thuật hiện đại, được ứng dụng rộng rãi trong Y khoa, như trong chuẩn đoán bệnh di truyền, bệnh do vi khuẩn, virus, ADN “dấu vân tay”, xác định huyết thống…

    Nguyên lý hoạt động của PCR là tạo ra một lượng lớn các bản sao ADN từ một đoạn ADN chọn lọc, ở môi trường in vitro tương tự như trong quá trình phân bào, trong một thời gian ngắn. Lượng lớn ADN tạo thành được so sánh, đối chiếu với các mẫu chuẩn tại các ngân hàng dữ liệu ADN, các thông số, các đặc điểm chuẩn đã có sẵn để đưa ra kết quả.

    Vậy, trong trường hợp vật chất di truyền không phải là ADN thì sao? Với những virus có vật chất di truyền là ARN, liệu có sử dụng được PRC không?

    Để hiểu rõ vấn đề này chúng ta cần phân biệt được 2 kiểu phản ứng PCR: 

    • Phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase thời gian thực

      (

      Real-time PCR

      )

      , còn gọi là qPCR.

    • Phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase sao chép ngược (

      Reverse transcription PCR

      ), gọi tắt là RT-PCR

    qPCR là quá trình khuếch đại (sao chép) một đoạn ADN xác định lên hàng trăm nghìn lần, đủ để phân tích. Trước đó, các mẫu xét nghiệm được xử lý bằng hóa chất để  tách chiết ADN từ mẫu đó.

    qPCR, ngoài là “PCR định lượng”, còn có nhiều các ứng dụng khác, tiêu biểu như:

    • Phát hiện gene mục tiêu (Định tính). Kết quả có thể là Âm/Dương 

    • Xác định kiểu gene (genotype, týp) của gene mục tiêu. Kết quả trả ra là genotype A, B, C, v.v…, 

    Một số phản ứng khuếch đại ADN có bản chất là PCR, chúng đẳng nhiệt, nghĩa là chúng chạy ở một nhiệt độ không đổi. Và tiêu biểu nhất là khuếch đại phụ thuộc vào enzyme Helicase – một loại enzyme tháo xoắn – tương tự như PCR truyền thống, nhưng sử dụng nhiệt độ không đổi thay vì qua các bước tách chuỗi đôi ADN và phối hợp/mở rộng chuỗi bởi biến đổi nhiệt.

    Hai phương pháp phổ biến để phát hiện các sản phẩm trong qPCR là sử dụng:

    • Thuốc nhuộm huỳnh quang không đặc hiệu xen kẽ với bất kỳ ADN sợi kép.

    • Đầu dò đặc hiệu gồm oligonucleotide được dán nhãn bằng máy phóng 

      huỳnh quang

      .

    RT-PCR hiểu đơn giản là: đầu tiên cần sử dụng quá trình phiên mã ngược (tức chuyển ARN thành ADN lấy từ mẫu virus hay vi khuẩn có vật chất di truyền là ARN) để thu được ADN, sau đó dùng qPCR để khuếch đại ADN đó, đủ để phân tích. Quy trình RT-PCR thường cần khoảng 3h hoặc hơn.

    Hình 1. RT-PCR và qPCR

    RT-PCR có thể được tiến hành theo phương thức một bước và hai bước.

    * RT-qPCR một bước, giai đoạn tổng hợp ADN (phiên mã ngược) và qPCR được tiến hành trong cùng một ống phản ứng bằng cùng một enzym. Phương thức này chỉ có thể sử dụng mồi đặc hiệu.

    * RT-qPCR hai bước, giai đoạn tổng hợp ADN và qPCR được tiến hành trong hai ống phản ứng riêng biệt với enzym, đệm, thành phần và điều kiện phản ứng được tối ưu cho mỗi giai đoạn.

    Hình 2. Sao chép ngược (RT-PCR) và tổng hợp ADN (qPCR)

    Khuôn của RT-PCR là ARN, ARN này có thể nằm trong hỗn hợp ARN tổng số hoặc chỉ riêng mARN. Tách chiết ARN tổng số cần ít bước thực hiện hơn, giúp cho hiệu suất tách chiết cao hơn đồng thời thuận lợi hơn khi định mức lượng tế bào đầu vào. Ngoài ra, do không có bước làm giàu riêng mARN, sử dụng ARN tổng số không gây khác biệt trong hiệu suất tách chiết các loại mARN khác nhau. Những ưu thế trên đã giúp cho ARN tổng số được ưu tiên chọn làm vật liệu khởi đầu phù hợp cho RT-PCR hơn là mARN tinh sạch chỉ giúp phản ứng có độ nhạy cao hơn một chút.

    Hình 3. Một số loại mồi dùng trong RT-PCR.

    Mồi (Primer) phổ biến hay dùng trong RT-PCR là oligo dT và mồi ngẫu nhiên, nó sẽ liên kết bổ sung với khuôn ARN và làm điểm bắt đầu cho phản ứng tổng hợp ADN.

    Enzym phiên mã ngược tiến hành phản ứng tổng hợp ADNc từ khuôn ARN. Một số enzym có hoạt tính RNAse cho phép phân hủy khuôn ARN sau khi đã tổng hợp ADN. Nếu enzym không có hoạt tính này, có thể cần bổ sung RNAse nhằm tăng hiệu quả của qPCR.

    Loại enzym phiên mã ngược thường dùng là enzym phiên mã ngược của virus ung thư bạch cầu chuột moloney (M-MLV) và virus cúm gia cầm (AMV). Tiêu chuẩn của một enzym phiên mã ngược lý tưởng cho phản ứng RT-PCR là có độ bền nhiệt tốt, cho phép tổng hợp hiệu quả ADN ở nhiệt độ cao trên những khuôn ARN có nhiều vùng cấu trúc bậc hai.

    Cặp mồi lý tưởng cho phản ứng qPCR trong RT-PCR thường được thiết kế nằm trùm qua vị trí nối giữa hai exon. Một trong hai mồi sẽ nằm vắt ngang vị trí nối giữa 2 exon này, khiến cho mồi chỉ bắt cặp đặc hiệu với ADN mà không thể liên kết với ADN tổng số do ở ADN tổng số chứa intron nằm xen giữa các exon. Thiết kế này giúp loại bỏ nguy cơ khuếch đại nhầm ADN tổng số.

    Nếu không thể thiết kế mồi chùm qua vị trí nối giữa exon hoặc nằm trên 2 exon được ngăn cách bới intron dài, cần phải xử lý mẫu ARN với enzyme RNAse-free ADNase I hoặc ds-ADNase để loại bỏ ADN tổng số.

    Hình 4. Thiết kế đoạn mồi trong RT-PCR

    Khác với các phương pháp PCR thông thường hay qPCR chỉ khuếch đại được ADN thì RT-PCR cho phép chúng ta xác định được cả những loại virus, vi khuẩn mang vật chất di truyền là ARN cũng như xác định được trình tự của một đoạn ARN bất kì nào đó một cách dễ dàng hơn.

    Đây cũng là một trong những phương pháp được áp dụng nhiều nhất song song với test kháng thể (antibodies) để phục vụ cho truy vết và xét nghiệm một sô loại virus như Zika, HIV, sởi,… nói chung cũng như SARS-CoV-2 đang hoành hành gần đây nói riêng.

    TÀI LIỆU THAM KHẢO

    1. ThS. BS. Vũ Thị Thúy Chi, Xét nghiệm PCR có những ưu – nhược điểm gì? Trung tâm Xét nghiệm, Bệnh viện Đa khoa MEDLATEC, 2022

    2. Công ty TNHH Hamesco Việt Nam, Kĩ thuật Real-time PCR là gì? 2022.

    3. RT-qPCR – Các nguyên lý cơ bản, Sinh học phân tử, Công nghệ sinh học, Dịch và tổng hợp từ Thermo Scientific BioMedia VN.

    4. Nguyễn Thành Khôi, 4 Sự thật gây mất lòng về real-time PCR! Sinh học phân tử.

    5. Xét Nghiệm SARS-CoV-2 / COVID-19, Bệnh viện Nguyễn Tri Phương.

    6. Kỹ thuật Realtime PCR – đếm tải lượng virus, vi khuẩn, BioMedia, 2022.

    7. chúng tôi Trần Bá Thoại, Uỷ viên BCH Hội Nội tiết Việt Nam, Xét nghiệm PCR trong chẩn đoán Y khoa, Đại học Phan Châu Trinh

    Hiệu đính: chúng tôi Ngô Thiện

    =====

    Để nhận tư vấn về sản phẩm và đặt hàng, vui lòng liên hệ:

    CÔNG TY CỔ PHẦN DƯỢC PHẨM FYKOFA

    Hotline: 1800 234 555 (Miễn phí)

    Email: [email protected]

    Website: www.fykofa.com

    Fanpage: www.fb.com/duocphamFYKOFA

    --- Bài cũ hơn ---

  • Về Các Tội Xâm Phạm Tính Mạng, Sức Khỏe, Nhân Phẩm, Danh Dự Của Con Người (Phần I)
  • Câu Hỏi Thường Gặp Trong Ngoại Thương (Chuẩn Nhất)
  • Các Từ Tiếng Anh Dễ Gây Nhầm Lẫn Khi Sử Dụng
  • Sự Khác Biệt Giữu Forex Và Chứng Khoán
  • Website Là Gì? Phân Biệt Các Loại Website Trong Thiết Kế Web
  • Xét Nghiệm Hpv Là Gì? Phương Pháp Xét Nghiệm

    --- Bài mới hơn ---

  • Xét Nghiệm Vi Khuẩn Hp Các Phương Pháp Chuẩn Nhất 2022
  • Tp.hcm: Xét Nghiệm Hpv Là Gì ? Bao Lâu Có Kết Quả ?
  • Xét Nghiệm Hpv Sùi Mào Gà Bao Lâu Thì Có Kết Quả?
  • Xét Nghiệm Hpv Là Gì? Xét Nghiệm Ở Đâu Và Chi Phí Xét Nghiệm Bao Nhiêu Tiền
  • Các Phương Pháp Xét Nghiệm Chẩn Đoán Virus Hpv
  • Thực hiện xét nghiệm hpv là phương pháp tốt nhất để chẩn đoán sớm nguy cơ mắc những bệnh do virus này gây nên. Ảnh hưởng của HPV tới sức khỏe là cực kỳ lớn gây ra nhiều bệnh lý nguy hiểm. HPV nổi tiếng là chủng virus gây ra tình trạng ung thư cổ tử cung phổ biến ở nữ giới.

    HPV hay Human Papilloma Virus là loại virus có cơ chế gây mọc u nhú ở khắp cơ thể. Chúng có tới hơn 120 chủng virus khác nhau đã được tìm thấy. Đa số những chủng virus này không gây bệnh hoặc cơ thể tự đào thải được chúng. Trong số đó có khoảng hơn 40 chủng là gây bệnh, có chủng nguy cơ cao, chủng nguy cơ thấp.

    Người bị nhiễm HPV là các chủng gây bệnh sẽ phải chịu ảnh hưởng rất lớn. HPV nếu nhẹ thì gây các bệnh u nhú có thể điều trị được như sùi mào gà. Nặng thì gây nên các bệnh ung thư với phổ biến nhất hiện nay là ung thư cổ tử cung. Trong số đó những chủng cực kỳ nguy hiểm như 16,18 chiếm tới hơn 70% những người bị ung thư cổ tử cung. Khoảng 99% các ca ung thư cổ tử cung tìm thấy virus HPV gây bệnh.

    Xét nghiệm HPV là phương pháp duy nhất để tìm kiếm sự có mặt của virus gây bệnh. Điều này giúp người bệnh có khả năng phát hiện sớm bệnh hoặc tiến hành phòng tránh. Tỉ lệ sống sót do ung thư nếu được điều trị sớm là cực kỳ cao. Hơn nữa xét nghiệm hpv còn giúp phát hiện và điều trị bệnh sùi mào gà.

    Đa số người nhiễm HPV có triệu chứng bệnh thường bắt đầu ở tuổi 30. Vì thế mà các bác sĩ thường khuyên chị em phụ nữ đi làm xét nghiệm ở độ tuổi này. Khi đó sẽ đảm bảo tầm soát ung thư cổ tử cung và sùi mào gà sớm nhất.

    Thực hiện xét nghiệm hpv có 2 dạng khác nhau: xét nghiệm hpv và xét nghiệm Pap smear. Phương pháp xét nghiệm chủ yếu được áp dụng cho chị em phụ nữ trên 30 tuổi. Cụ thể:

    Đây là phương pháp lấy mẫu tế bào ở vùng cổ tử cung lên nhuộm soi trên kính hiển vi. Khi bác sĩ áp dụng kỹ thuật nếu có virus HPV tồn tại, có tổn thương tiền ung thư, đã mắc ung thư đều phát hiện ra được. Pap smear chủ yếu là xét nghiệm hpv gây ung thư cổ tử cung. Kết quả sau thực hiện chỉ cho biết có nhiễm hpv hay không.

    Thường thì xét nghiệm hpv dù là theo phương pháp nào cũng chỉ có tác dụng chẩn đoán. Để biết có nguy cơ ung thư hay không cần tiến hành kiểm tra bằng các cách khác. Có thể là các phương pháp chụp chiếu, nội soi, siêu âm…

    Với những người dưới 30 tuổi đã có quan hệ thì chỉ cần làm xét nghiệm PAP. Đây là lời khuyên bác sĩ thường đưa ra, xét nghiệm hpv chỉ cần thiết khi kết quả PAP smear cho thấy bất thường. Điều này là bởi nguy cơ ung thư ở phụ nữ độ tuổi này rất thấp. Việc kiểm tra nhiễm hpv cũng không có nhiều tác dụng vì chưa phát bệnh.

    Đối với phụ nữ trên 30 tuổi thì nên tiến hành cả hai xét nghiệm cùng lúc. Các phương pháp này sẽ giúp chẩn đoán rõ nguy cơ người bệnh mắc ung thư cổ tử cung và sùi mào gà. Ngoài ra, nhóm chị em phụ nữ đã tiêm vắc xin phòng ngừa HPV cũng cần đi làm xét nghiệm theo khuyến nghị.

    Có một số nhóm người nguy cơ cao mắc ung thư cổ tử cung hơn. Điển hình như người trong gia đình có tiền sử ung thư cổ tử cung, người ghép tạng, người sử dụng thuốc DES điều trị bệnh… thì nên làm kiểm tra xét nghiệm hpv đều đặn.

    Nếu có nhu cầu xét nghiệm HPV nên tiến hành sớm và đều đặn. Bác sĩ có thể đảm bảo nguy cơ ảnh hưởng bệnh thấp hơn nếu bệnh nhân đi điều trị sớm. Xét nghiệm hpv là cách tốt nhất để chẩn đoán các bệnh như sùi mào gà. Hãy tới những phòng khám chuyên bệnh uy tín như phòng khám Thành Đô – Bắc Ninh để được tư vấn tỉ mỉ kỹ lưỡng.

    --- Bài cũ hơn ---

  • Nên Xét Nghiệm Hpv Bằng Phương Pháp Nào?
  • Xét Nghiệm Hpv Là Gì Bao Nhiêu Tiền Bao Lâu Có Kết Quả * Hi Bacsi
  • Có Bao Nhiêu Cách Xét Nghiệm Hpv Chính Xác
  • Tầm Soát Ung Thư Cổ Tử Cung
  • Xử Lý Nước Thải Yếm Khí Bằng Công Nghệ Uasb
  • Web hay
  • Links hay
  • Push
  • Chủ đề top 10
  • Chủ đề top 20
  • Chủ đề top 30
  • Chủ đề top 40
  • Chủ đề top 50
  • Chủ đề top 60
  • Chủ đề top 70
  • Chủ đề top 80
  • Chủ đề top 90
  • Chủ đề top 100
  • Bài viết top 10
  • Bài viết top 20
  • Bài viết top 30
  • Bài viết top 40
  • Bài viết top 50
  • Bài viết top 60
  • Bài viết top 70
  • Bài viết top 80
  • Bài viết top 90
  • Bài viết top 100